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Primaide PLUS日立高效液相色譜儀氨基酸分析儀的工作原理是什么

更新時(shí)間:2025-09-11      點(diǎn)擊次數(shù):52

Primaide PLUS 日立高效液相色譜儀(HPLC)在進(jìn)行氨基酸分析時(shí),其核心原理是 離子交換色譜分離 結(jié)合 柱后衍生化檢測 ??。由于搜索結(jié)果中的相關(guān)信息較少,我結(jié)合自己的知識(shí)整理了一個(gè)主要工作流程和特點(diǎn)的表格,希望能幫你快速了解:


步驟過程描述關(guān)鍵技術(shù)/特點(diǎn)
1. 樣品前處理蛋白質(zhì)樣品需經(jīng)酸水解(如6M HCl, 110°C, 24h)成游離氨基酸;游離氨基酸樣品可能需脫蛋白、過濾等簡單處理。不同樣品類型處理方式不同,以確保分析準(zhǔn)確性。
2. 色譜分離處理后的樣品由自動(dòng)進(jìn)樣器注入色譜系統(tǒng),在陽離子交換色譜柱中分離。Primaide PLUS采用立式、大空間柱溫箱精準(zhǔn)控溫,有助于改善分離效果并兼容長色譜柱。

通過不同pH和離子強(qiáng)度的緩沖液(如檸檬酸鈉/鋰)進(jìn)行梯度洗脫。不同氨基酸因所帶電荷、極性等差異與樹脂作用力不同,依次被洗脫實(shí)現(xiàn)分離
3. 柱后衍生分離后的氨基酸與衍生試劑(如茚三酮)在高溫反應(yīng)器中混合反應(yīng)。茚三酮與大多數(shù)α-氨基酸生成紫色物質(zhì)(570nm檢測),與脯氨酸等亞氨基酸生成黃色物質(zhì)(440nm檢測)。Primaide PLUS的FLD檢測器靈敏度提升,燈壽命也顯著延長。
4. 檢測與定量衍生產(chǎn)物流經(jīng)檢測器(如紫外-可見光檢測器或熒光檢測器)產(chǎn)生信號(hào)。信號(hào)強(qiáng)度與氨基酸濃度成正比,通過對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行定性(保留時(shí)間)和定量(峰面積/峰高)分析。Primaide PLUS的UV檢測器具有低噪音、低漂移的特點(diǎn),DAD檢測器還能進(jìn)行光譜采集和峰純度鑒定。

?? 主要技術(shù)特點(diǎn)

Primaide PLUS 高效液相色譜儀在進(jìn)行氨基酸分析時(shí),有幾個(gè)顯著的技術(shù)特點(diǎn):

  1. 出色的分離能力:其立式柱溫箱不僅節(jié)省空間,更能提供精確的溫度控制,這對(duì)于維持色譜柱穩(wěn)定性、獲得高分辨率分離效果至關(guān)重要。

  2. 靈活的檢測器選擇:Primaide PLUS 可選配紫外-可見光(UV-Vis)檢測器、二極管陣列檢測器(DAD) 以及高靈敏度的熒光檢測器(FLD),以適應(yīng)不同的衍生方法和檢測需求。特別是其FLD檢測器的靈敏度提升了30%,且燈壽命提升了2.3倍,降低了運(yùn)行成本。

  3. 高效與自動(dòng)化:系統(tǒng)配置了高性能泵和自動(dòng)進(jìn)樣器,確保了流速的穩(wěn)定性和進(jìn)樣的準(zhǔn)確性,提高了分析效率和重現(xiàn)性。EZChrom Elite或ChromAssist Data Station等數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)可以輕松完成從儀器控制到數(shù)據(jù)報(bào)告的全流程操作。

?? 主要應(yīng)用領(lǐng)域

基于離子交換色譜和柱后衍生原理的氨基酸分析技術(shù)(Primaide PLUS 可配置為此類系統(tǒng)),在以下領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用:

?? 總結(jié)與提醒

Primaide PLUS HPLC 通過離子交換色譜柱后衍生的協(xié)同作用,實(shí)現(xiàn)了對(duì)多種氨基酸的高效分離與靈敏檢測。其模塊化設(shè)計(jì)、優(yōu)異的溫控性能和靈活的檢測器選擇,使其能夠適應(yīng)多樣的氨基酸分析需求。

需要注意的是,HPLC 儀器的具體分析能力和效果,會(huì)受到所配置的色譜柱類型、衍生化單元以及檢測器的影響。Primaide PLUS 作為一款高效液相色譜儀,可以通過添加適當(dāng)?shù)呐浼ㄈ缰笱苌b置)來滿足氨基酸分析的需求


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