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NanoEntek 高通量熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)器技術(shù)解析:效率與精準(zhǔn)度的細(xì)胞

更新時(shí)間:2026-01-21      點(diǎn)擊次數(shù):26

在現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開(kāi)發(fā)及細(xì)胞治療領(lǐng)域,準(zhǔn)確、快速地獲取細(xì)胞濃度、活力與類(lèi)型信息,是決定實(shí)驗(yàn)重復(fù)性、生產(chǎn)質(zhì)量控制乃至臨床療效的基石。傳統(tǒng)手動(dòng)計(jì)數(shù)與基礎(chǔ)明場(chǎng)計(jì)數(shù)儀在通量、準(zhǔn)確性,尤其是在復(fù)雜樣本(如原代細(xì)胞、免疫治療細(xì)胞)的分析上已顯乏力。韓國(guó)NanoEntek公司憑借其深厚的NT-IT-BT(納米-信息-生物技術(shù))融合技術(shù),推出的EVE™ HT FL高通量熒光自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,正是為應(yīng)對(duì)這一系列挑戰(zhàn)而生的性產(chǎn)品。它不僅僅是一臺(tái)計(jì)數(shù)設(shè)備,更是一個(gè)集成熒光檢測(cè)、高通量處理與合規(guī)數(shù)據(jù)管理的智能化細(xì)胞分析平臺(tái)。

一、產(chǎn)品核心定位:當(dāng)高通量遇見(jiàn)熒光精準(zhǔn)

NanoEntek EVE™ HT FL的核心設(shè)計(jì)理念是 “效率"與“洞察力"的結(jié)合。在繼承了該系列明星產(chǎn)品EVE™ HT(明場(chǎng)高通量型號(hào))可在約3分鐘內(nèi)完成48個(gè)樣本處理的驚人效率之上,HT FL型號(hào)的關(guān)鍵進(jìn)化在于引入了基于AO(吖啶橙)/DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吖啶)染色的雙熒光檢測(cè)通道。這一升級(jí)使其從一臺(tái)高效的“細(xì)胞統(tǒng)計(jì)員",蛻變?yōu)槟芏床旒?xì)胞核內(nèi)生命狀態(tài)的“細(xì)胞分析師"。

其革命性在于,將原本需要多臺(tái)不同儀器、多個(gè)操作步驟才能完成的——大批量樣本處理、活死精確鑒別、特定細(xì)胞亞群分析——整合進(jìn)一次不到6分鐘的自動(dòng)化流程中。這直接回應(yīng)了制藥行業(yè)GMP合規(guī)性生產(chǎn)、細(xì)胞治療產(chǎn)品快速質(zhì)檢以及大型科研項(xiàng)目對(duì)海量數(shù)據(jù)的一致性和可追溯性的嚴(yán)苛要求。

二、核心技術(shù)規(guī)格與系統(tǒng)構(gòu)成

EVE™ HT FL的系統(tǒng)設(shè)計(jì)圍繞高通量、熒光檢測(cè)與用戶友好性展開(kāi)。以下是基于其產(chǎn)品定位與技術(shù)公告的核心規(guī)格整合與解讀:

參數(shù)類(lèi)別EVE™ HT FL 技術(shù)規(guī)格
檢測(cè)原理明場(chǎng) & 雙熒光通道(AO/DAPI)。熒光計(jì)數(shù)采用核計(jì)數(shù)法,精準(zhǔn)度超越基于膜完整性的明場(chǎng)計(jì)數(shù)。
通量與速度48個(gè)樣本/次;完整檢測(cè)時(shí)間約3-6分鐘。
樣本需求每孔僅需20μL樣本(與染液混合后),極大節(jié)約珍貴樣本。
檢測(cè)濃度范圍廣達(dá) 10,000 ~ 20,000,000 cells/mL(基于EVE-HT參數(shù)推測(cè))。
細(xì)胞大小范圍寬廣的 1 - 85 μm,可覆蓋從血小板到巨大細(xì)胞株的各類(lèi)細(xì)胞。
核心算法圖像分割與“分塊技術(shù)",能準(zhǔn)確識(shí)別與計(jì)數(shù)成團(tuán)細(xì)胞、不規(guī)則形狀細(xì)胞,有效排除碎片干擾。
數(shù)據(jù)合規(guī)性嚴(yán)格遵循 FDA 21 CFR Part 11 法規(guī),具備完整的電子簽名、審計(jì)追蹤功能,滿足制藥行業(yè)數(shù)據(jù)完整性要求。
數(shù)據(jù)輸出自動(dòng)生成細(xì)胞濃度、存活率、大小分布圖,并可導(dǎo)出包括原始圖像在內(nèi)的多種格式報(bào)告。

對(duì)比:EVE™ HT FL 與 明場(chǎng)型號(hào)核心差異

特性EVE™ HT FL (熒光型號(hào))EVE™ HT (明場(chǎng)型號(hào))
檢測(cè)模式明場(chǎng) + 雙熒光(AO/DAPI)僅明場(chǎng)(臺(tái)盼藍(lán)染色)
計(jì)數(shù)原理熒光核染色,直接檢測(cè)細(xì)胞核,不受細(xì)胞形態(tài)、碎片影響染料排斥法,依賴細(xì)胞膜完整性
核心優(yōu)勢(shì)結(jié)果更精準(zhǔn),可分析凋亡、特定細(xì)胞亞群速度快,成本低,適用于常規(guī)活力檢測(cè)
合規(guī)性符合21 CFR Part 11符合21 CFR Part 11
樣本量/孔20μL10μL

三、工作原理深度解析:熒光核計(jì)數(shù)法的精準(zhǔn)內(nèi)核

EVE™ HT FL 的性能,植根于其“熒光核計(jì)數(shù)法"與智能化圖像分析的深度融合。

  1. 熒光染色與特異性激發(fā):操作人員將細(xì)胞樣本與AO/DAPI熒光染料混合后加入專(zhuān)用計(jì)數(shù)板。AO可穿透活細(xì)胞膜,與DNA(綠色熒光)和RNA(紅色熒光)結(jié)合,不僅能區(qū)分死細(xì)胞,還能提供細(xì)胞周期狀態(tài)信息;DAPI則特異性結(jié)合雙鏈DNA,發(fā)出藍(lán)色熒光,是識(shí)別有核細(xì)胞的金標(biāo)準(zhǔn)。儀器內(nèi)置的精密LED光源與特定濾光片系統(tǒng),實(shí)現(xiàn)對(duì)不同熒光染料的高效、純凈激發(fā)與信號(hào)收集。

  2. 高通量自動(dòng)成像:加載48樣本的計(jì)數(shù)板后,儀器全自動(dòng)完成對(duì)每個(gè)樣本孔的快速對(duì)焦、多通道(明場(chǎng)、熒光通道)圖像采集。這一過(guò)程無(wú)需人工干預(yù),保證了所有樣本在一致的條件下被記錄。

  3. 智能圖像分析與核計(jì)數(shù)算法:這是精準(zhǔn)度的關(guān)鍵。軟件并非簡(jiǎn)單識(shí)別明場(chǎng)下的細(xì)胞輪廓(易受碎片、氣泡、細(xì)胞聚團(tuán)干擾),而是首先在熒光通道中精確定位每一個(gè)發(fā)光的細(xì)胞核。因?yàn)闊o(wú)論細(xì)胞形態(tài)如何變化,其細(xì)胞核在大小和熒光信號(hào)上相對(duì)穩(wěn)定。通過(guò)識(shí)別“核"這個(gè)的生物學(xué)標(biāo)志,儀器能:

    • 精準(zhǔn)分割粘連細(xì)胞:即使細(xì)胞緊密成團(tuán),只要核信號(hào)可分,即被計(jì)為獨(dú)立個(gè)體。

    • 有效排除非細(xì)胞雜質(zhì):無(wú)核的細(xì)胞碎片、蛋白沉淀等不發(fā)出特異性熒光,被系統(tǒng)自動(dòng)忽略。

    • 提供更真實(shí)的存活率:基于核染色的死活判斷(如AO雙染),比基于膜完整性的臺(tái)盼藍(lán)法更能反映早期的細(xì)胞凋亡狀態(tài)。

四、核心應(yīng)用場(chǎng)景與價(jià)值

  1. 細(xì)胞治療與免疫學(xué):在CAR-T、CAR-NK、干細(xì)胞治療等前沿領(lǐng)域,細(xì)胞產(chǎn)品是“活的藥物"。EVE™ HT FL不僅能快速質(zhì)檢大批量產(chǎn)品的活細(xì)胞總數(shù)與存活率,更能通過(guò)熒光分析監(jiān)控細(xì)胞亞群的純度、激活狀態(tài)或早期凋亡,為工藝優(yōu)化和放行提供深層依據(jù)。

  2. 藥物篩選與毒理學(xué)研究:在高通量藥物篩選中,需要同時(shí)對(duì)成百上千個(gè)處理組的細(xì)胞進(jìn)行增殖與毒性評(píng)估。其48通量及快速分析能力可極大加速篩選流程。熒光通道更能靈敏地檢測(cè)到藥物誘導(dǎo)的早期細(xì)胞凋亡,比傳統(tǒng)MTT或臺(tái)盼藍(lán)法提供更早期、更機(jī)制的毒性數(shù)據(jù)。

  3. 生物制藥過(guò)程監(jiān)控:從細(xì)胞庫(kù)復(fù)蘇、種子擴(kuò)增到生物反應(yīng)器培養(yǎng),需要頻繁監(jiān)測(cè)細(xì)胞密度與活力以優(yōu)化工藝參數(shù)。儀器的高重現(xiàn)性、合規(guī)數(shù)據(jù)管理特性,確保了從研發(fā)到生產(chǎn)全鏈條數(shù)據(jù)的一致、可靠與可審計(jì),符合GMP/GLP規(guī)范。

  4. 復(fù)雜樣本分析:對(duì)于容易聚集的細(xì)胞系(如HepG2)、原代細(xì)胞、外周血單核細(xì)胞等,其的成團(tuán)細(xì)胞分析算法能提供遠(yuǎn)優(yōu)于人工計(jì)數(shù)和其他計(jì)數(shù)儀的可信結(jié)果。

結(jié)論

NanoEntek EVE™ HT FL高通量熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,代表了當(dāng)前自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)領(lǐng)域向更高維度整合分析能力發(fā)展的明確趨勢(shì)。它成功地將高通量操作的效率、熒光檢測(cè)的精準(zhǔn)、以及工業(yè)級(jí)的數(shù)據(jù)合規(guī)性融為一體,解決了生物醫(yī)藥研發(fā)與生產(chǎn)中“既要快,又要準(zhǔn),還要可信"的核心痛點(diǎn)。

它不僅是一個(gè)實(shí)驗(yàn)工具的效率提升,更是一種質(zhì)量觀念的踐行:通過(guò)將客觀、可追溯的量化數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)貫穿于細(xì)胞研究的每一個(gè)環(huán)節(jié),為最終科研成果的可靠性、治療產(chǎn)品的安全有效性,構(gòu)筑起一道堅(jiān)實(shí)的技術(shù)屏障。在精準(zhǔn)醫(yī)療與工業(yè)化生物制造的時(shí)代,EVE™ HT FL這樣的設(shè)備,正從支持性角色轉(zhuǎn)變?yōu)楹诵牡纳a(chǎn)力與質(zhì)量基石。


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